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        層析冷柜工作原理

        點擊次數:2890    發布時間:2015-08-14

        層析(也叫層析柜),與普通的儲存柜有何不同?它又是如何工作的?且讓拓紛為您簡單介紹下層析工作原理。

        生物分子間存在很多特異性的相互作用,它們之間能夠實現專一而可逆的結合,這種結合力就稱為親和力。親和層析就是通過將具有親和力的兩個分子中一個固定在不溶性基質上,利用分子間親和力的特異性和可逆性,對另一個分子進行分離純化。被固定在基質上的分子稱為配體,配體和基質是共價結合的,構成親和層析的固定相,稱為親和吸附劑。親和層析時首先選擇與待分離的生物大分子有親和力物質作為配體,并將配體共價結合在適當的不溶性基質上。將制備的親和吸附劑裝柱平衡,當樣品溶液通過親和層析柱的時候,待分離的生物分子就與配體發生特異性的結合,從而留在固定相上;而其它雜質不能與配體結合,仍在流動相中,并隨洗脫液流出,這樣層析柱中就只有待分離的生物分子。通過適當的洗脫液將其從配體上洗脫下來,就得到了純化的待分離物質。

        層析就是根據這個工作原理,利用不同物質理化性質的差異而建立起來的層析技術,為實驗提供適合的溫度環境。所有的層析系統都由兩個相組成:一是固定相,另一是流動相。當待分離的混合物隨流動相通過固定相時,由于各組分的理化性質存在差異,與兩相發生相互作用(吸附、溶解、結合等)的能力不同,在兩相中的分配(含量比)不同,且隨流動相向前移動,各組分不斷地在兩相中進行再分配。分部收集流出液,可得到樣品中所含的各單一組分,從而達到將各組分分離的目的。

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